產(chǎn)品介紹
細胞名稱:人肝癌細胞
形態(tài)特性:上皮細胞樣
生長特性:貼壁生長
特征特性: Hep-3b細胞建系于1979年,源自一位患有肝癌的7歲黑人男童。該細胞產(chǎn)生甲胎蛋白(alpha-fetoprotein)、乙肝表面抗原(BHsAg) 、白蛋白、巨球蛋白、α- 抗胰蛋白酶(alphal-antitrypsin)、轉(zhuǎn)鐵蛋白、補體(C3)、C3活性載體,纖維原等,具有廣泛的研究價值。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Sa
傳代方法: 1:4~1:6傳代,每周換液2次
傳代情況: C2
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
產(chǎn)品名稱 | 人肝癌細胞 |
英文簡稱 | Hep3b |
狀態(tài) | 貼壁 |
細胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細胞培養(yǎng)的操作步驟:
1.人肝癌細胞吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),導(dǎo)致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮?;靹蚣毎麜r盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;
4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。